據(jù)麥姆斯咨詢報道,中科院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院醫(yī)工所生物醫(yī)學(xué)光學(xué)與分子影像研究中心儲軍課題組,研發(fā)了在活細(xì)胞內(nèi)具有12倍熒光變化的高性能基因編碼的cAMP綠色熒光探針——G-Flamp1,并結(jié)合顯微成像和光纖記錄等技術(shù),實(shí)時高靈敏監(jiān)測了果蠅和小鼠等模式生物在特定行為過程中特定神經(jīng)元的環(huán)磷酸腺苷(cAMP)信號時空動力學(xué)變化,探索了cAMP動力學(xué)與動物行為之間的內(nèi)在關(guān)聯(lián)。相關(guān)研究成果以“A high-performance genetically encoded fluorescent indicator for in vivo cAMP imaging”為題,于近日發(fā)表于Nature Communications期刊。審稿人認(rèn)為該探針具有非常棒的性質(zhì),在熒光探針的原性能上具有很大的提升,該探針打開了很多有趣的cAMP信號研究的大門。
G-Flamp1探針的開發(fā)和體外表征
細(xì)胞不斷地接收周圍環(huán)境的信號,并將其轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞內(nèi)相應(yīng)分子數(shù)量、分布和活性狀態(tài)的變化,從而改變細(xì)胞的形態(tài)和生物學(xué)功能等。該過程的異常與疾病發(fā)生發(fā)展相關(guān)。
研究人員選取細(xì)胞內(nèi)重要的第二信使分子cAMP作為研究目標(biāo)。cAMP可傳遞細(xì)胞表面多種G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)的信息,在學(xué)習(xí)與記憶、藥物成癮、運(yùn)動控制、免疫等過程中發(fā)揮重要作用。
G-Flamp1通過體內(nèi)雙光子成像揭示了強(qiáng)制跑步在小鼠運(yùn)動皮層神經(jīng)元中所誘導(dǎo)產(chǎn)生的cAMP信號
“活細(xì)胞和活體水平的cAMP分子濃度變化的高時空分辨率熒光成像是解析cAMP信號通路及其生物學(xué)功能的重要基礎(chǔ)。因此,開發(fā)高靈敏的cAMP熒光探針成為研究復(fù)雜生物過程的關(guān)鍵。”論文通訊作者儲軍表示。
于是研究人員設(shè)計(jì)并得到了具有高亮度、高靈敏度、合適親和力和快響應(yīng)速度等特征的高性能基因編碼cAMP綠色熒光探針G-Flamp1。該探針在活細(xì)胞中的熒光變化可達(dá)12倍,是目前少數(shù)幾個在10倍以上的熒光探針之一。研究人員利用腺相關(guān)病毒在小鼠中成功驗(yàn)證了該探針在活體動物中檢測cAMP動態(tài)變化的實(shí)用性。
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原文標(biāo)題:深圳先進(jìn)院開發(fā)出新型熒光探針,用于cAMP信號研究
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